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BTB液是溴麝香草酚蓝指示剂，短时间使用此指示剂对鱼无毒害作用。BTB遇CO2(实际上是BTB与H2CO3中的H+反应)后由蓝色变成黄色。
验证实验的具体操作步骤是：取甲、乙两只大烧杯，分别注入等量的清水，在两只烧杯中各滴入数滴0.1%的BTB液，使溶液呈蓝色。再取一条小鱼放入甲烧杯中。20～30 min后观察甲、乙两烧杯中水色的变化。在甲烧杯中由于小鱼呼吸作用释放出的CO2，使水中的BTB液由蓝色变为黄色，而乙烧杯中无颜色变化。
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