我成功克隆出抗狂犬病毒新抗体具潜在应用前景_生物科技动态

我成功克隆出抗狂犬病毒新抗体具潜在应用前景: 来源: 查字典生物网| 2013-01-17 发表| 教学分类：生物科技动态

日前，南京军区军事医学研究所科研人员制备出一株具有中和活性的抗狂犬病毒基因工程中和抗体Fab，证实该抗体与狂犬疫苗联用，对狂犬病毒暴露后小鼠具有较好的保护作用。研究论文发表在近期的《中国药理学报》上，由南京军区军事医学研究所朱进研究员、南京医科大学管晓虹教授、冯振卿教授、研究生李琛及其研究小组完成，为国家“863”资助项目。

狂犬病是由狂犬病毒引起的人畜共患急性传染病，病死率极高，发病后进展速度快，至多10天内死亡，死亡率几乎为100%。狂犬病毒基因组全长约12kb，具有5个结构基因，其中由G基因编码的糖蛋白，是病毒与宿主细胞结合的配体，介导了病毒与靶细胞的结合及病毒在神经系统中的分布，不但与病毒的毒力、致命性相关，而且是病毒的主要保护性抗原，能刺激机体产生中和抗体，抵抗病毒的感染。

目前，临床使用的抗狂犬病毒免疫球蛋白，主要来自狂犬病疫苗免疫人或马的抗狂犬病毒血清，抗体的产量受到限制且存在一定的安全隐患。基因工程抗体技术的完善与发展，为制备具备高亲和力的治疗性人源抗体提供新途径。人源抗体由于具有较低的免疫原性和较好的组织穿透性，使其能够更好地应用于疾病的临床治疗。

研究小组从人源免疫型抗狂犬病毒抗体库中筛选出的一株针对狂犬病毒糖蛋白的单链抗体，克隆出可变区基因，运用重叠延伸拼接的方法，分别制备Fd及L链，再进一步拼接成Fab基因，构建Fab表达载体，从而实现Fab的可溶性表达。研究通过间接ELISA与竞争ELISA、免疫共沉淀结合质谱分析及荧光抗体病毒中和实验(FAVN)分析抗体的免疫学特性。建立狂犬病昆明种鼠(KM鼠)模型，在个体水平比较分析Fab抗体、疫苗和人免疫球蛋白等对小鼠暴露后的预防和保护作用。

研究组认为，体外研究及小鼠狂犬病毒暴露后预防研究证实，抗体联合疫苗能够有效阻止狂犬病毒的感染，对狂犬病毒暴露后的小鼠具有预防保护作用，按照世界卫生组织(WHO)推荐的“鸡尾酒”疗法，这株抗体在狂犬病的预治中具有潜在的应用前景。

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